គោលការណ៍ និងវិធីសាស្រ្តនៃការវិភាគបរិមាណដោយ Liquid Chromatography

យន្តការបំបែកនៃ chromatography រាវគឺផ្អែកលើភាពខុសគ្នានៃទំនាក់ទំនងនៃសមាសធាតុនៅក្នុងល្បាយសម្រាប់ដំណាក់កាលទាំងពីរ។

យោងតាមដំណាក់កាលស្ថានីផ្សេងៗគ្នា ក្រូម៉ាតូក្រាមរាវត្រូវបានបែងចែកទៅជា ក្រូម៉ាតូក្រាមរាវ - រឹង ក្រូម៉ាតរាវរាវ និងក្រូម៉ាតូក្រាមដំណាក់កាលភ្ជាប់។ការប្រើប្រាស់យ៉ាងទូលំទូលាយបំផុតគឺ ក្រូម៉ាតូក្រាមរាវ-រឹងជាមួយស៊ីលីកាជែលជាសារធាតុបំពេញ និងក្រូម៉ាទីតដំណាក់កាលដែលភ្ជាប់ជាមួយមីក្រូស៊ីលីកាជាម៉ាទ្រីស។

យោងទៅតាមទម្រង់នៃដំណាក់កាលស្ថានី ក្រូម៉ាតូក្រាមរាវអាចបែងចែកទៅជា ក្រូម៉ាតូក្រាមជួរឈរ ក្រូម៉ាតូក្រាមក្រដាស និងក្រូម៉ាតូក្រាតស្រទាប់ស្តើង។យោងតាមសមត្ថភាព adsorption វាអាចត្រូវបានបែងចែកទៅជា adsorption chromatography, partition chromatography, ion exchange chromatography និង gel permeation chromatography ។

ក្នុងប៉ុន្មានឆ្នាំថ្មីៗនេះ ប្រព័ន្ធលំហូររាវដែលមានសម្ពាធខ្ពស់ត្រូវបានបន្ថែមទៅក្នុងប្រព័ន្ធក្រូម៉ាតូក្រាមជួរឈររាវ ដើម្បីធ្វើឱ្យដំណាក់កាលចល័តហូរយ៉ាងលឿនក្រោមសម្ពាធខ្ពស់ ដើម្បីបង្កើនប្រសិទ្ធភាពនៃការបំបែក ដូច្នេះប្រសិទ្ធភាពខ្ពស់ (ត្រូវបានគេស្គាល់ផងដែរថាជាសម្ពាធខ្ពស់) ក្រូម៉ាតូក្រាមរាវ បានផុសឡើង។

ផ្នែក
01 គោលការណ៍នៃការវិភាគបរិមាណនៃ Liquid Chromatography

ដើម្បីកំណត់បរិមាណដោយផ្អែកលើគុណភាព សារធាតុសុទ្ធត្រូវបានទាមទារជាស្តង់ដារ។

បរិមាណក្រូម៉ាតូក្រាមរាវគឺជាវិធីសាស្ត្របរិមាណដែលទាក់ទង៖ នោះគឺបរិមាណនៃការវិភាគនៅក្នុងល្បាយត្រូវបានប៉ាន់ប្រមាណពីចំនួនដែលគេស្គាល់នៃគំរូស្តង់ដារសុទ្ធ។

ផ្នែក
02 មូលដ្ឋានសម្រាប់បរិមាណដោយ Liquid Chromatography

បរិមាណនៃសមាសធាតុដែលបានវាស់ (W) គឺសមាមាត្រទៅនឹងតម្លៃឆ្លើយតប (A) (កម្ពស់កំពូល ឬតំបន់កំពូល) W=f×A។

កត្តាកែតម្រូវបរិមាណ (f)៖ វាគឺជាសមាមាត្រថេរនៃរូបមន្តគណនាបរិមាណ ហើយអត្ថន័យរូបវន្តរបស់វាគឺបរិមាណនៃសមាសធាតុវាស់វែងដែលតំណាងដោយតម្លៃឆ្លើយតបឯកតា (តំបន់កំពូល)។

កត្តាកែតម្រូវបរិមាណអាចទទួលបានពីចំនួនដែលគេស្គាល់នៃគំរូស្តង់ដារ និងតម្លៃឆ្លើយតបរបស់វា។

វាស់តម្លៃឆ្លើយតបនៃសមាសធាតុមិនស្គាល់ ហើយបរិមាណនៃសមាសធាតុអាចទទួលបានដោយកត្តាកែតម្រូវបរិមាណ។

ផ្នែក
03 ពាក្យទូទៅក្នុងការវិភាគបរិមាណ

គំរូ (សំណាក)៖ ដំណោះ​ស្រាយ​ដែល​មាន​ឧបករណ៍​វិភាគ​សម្រាប់​ការ​វិភាគ​ក្រូម៉ាត។បែងចែកជាគំរូស្តង់ដារ និងមិនស្គាល់។

ស្ដង់ដារ៖ ជាផលិតផលសុទ្ធដែលមានកំហាប់ដែលគេស្គាល់។មិនស្គាល់គំរូ (មិនស្គាល់)៖ ល្បាយដែលកំហាប់ដែលត្រូវធ្វើតេស្ត។

ទំងន់គំរូ៖ ទម្ងន់ដើមនៃគំរូដែលត្រូវធ្វើតេស្ត។

ការរំលាយ៖ កត្តារលាយនៃគំរូដែលមិនស្គាល់។

សមាសធាតុ៖ កំពូលក្រូម៉ាតត្រូនិចដែលត្រូវវិភាគជាបរិមាណ នោះគឺជាអ្នកវិភាគដែលមាតិកាមិនស្គាល់។

បរិមាណនៃសមាសធាតុ (បរិមាណ): មាតិកា (ឬកំហាប់) នៃសារធាតុដែលត្រូវធ្វើតេស្ត។

Integerity : ដំណើរការគណនានៃការវាស់តំបន់កំពូលនៃ chromatographic peak ដោយកុំព្យូទ័រ។

ខ្សែកោងការក្រិតតាមខ្នាត៖ ខ្សែកោងលីនេអ៊ែរនៃមាតិកាសមាសធាតុធៀបនឹងតម្លៃឆ្លើយតប ដែលបង្កើតឡើងពីបរិមាណនៃសារធាតុស្តង់ដារដែលគេស្គាល់ ប្រើដើម្បីកំណត់ខ្លឹមសារមិនស្គាល់នៃការវិភាគ។

ផ្នែក
04 ការវិភាគបរិមាណនៃ Liquid Chromatography

1. ជ្រើសរើសវិធីសាស្រ្ត chromatographic ដែលសមរម្យសម្រាប់ការវិភាគបរិមាណ៖

l បញ្ជាក់កម្រិតកំពូលនៃសមាសធាតុដែលបានរកឃើញ និងសម្រេចបាននូវដំណោះស្រាយ (R) ធំជាង 1.5

l កំណត់ភាពស៊ីសង្វាក់គ្នា (ភាពបរិសុទ្ធ) នៃកំពូល chromatographic នៃសមាសធាតុដែលបានសាកល្បង

l កំណត់ដែនកំណត់ការរកឃើញ និងកម្រិតបរិមាណនៃវិធីសាស្ត្រ។ភាពប្រែប្រួល និងជួរលីនេអ៊ែរ

2. បង្កើតខ្សែកោងក្រិតជាមួយនឹងគំរូស្តង់ដារនៃការប្រមូលផ្តុំផ្សេងៗគ្នា

3. ពិនិត្យភាពត្រឹមត្រូវនិងភាពជាក់លាក់នៃវិធីសាស្រ្តបរិមាណ

4. ប្រើកម្មវិធីគ្រប់គ្រង chromatography ដែលត្រូវគ្នា ដើម្បីអនុវត្តការប្រមូលគំរូ ដំណើរការទិន្នន័យ និងរបាយការណ៍លទ្ធផល

ផ្នែក
05 ការកំណត់បរិមាណកំពូល (គុណភាព)

កំណត់អត្តសញ្ញាណកំពូល chromatographic នីមួយៗតាមលក្ខណៈគុណភាព ដើម្បីជាបរិមាណ

ជាដំបូង ប្រើគំរូស្តង់ដារដើម្បីកំណត់ពេលវេលារក្សាទុក (Rt) នៃកំពូលក្រូម៉ាតូក្រាមដែលត្រូវកំណត់បរិមាណ។ដោយការប្រៀបធៀបរយៈពេលរក្សាទុក ស្វែងរកសមាសធាតុដែលត្រូវគ្នាទៅនឹងកំពូល chromatographic នីមួយៗនៅក្នុងគំរូដែលមិនស្គាល់។វិធីសាស្ត្រគុណភាពក្រូម៉ាតគឺដើម្បីប្រៀបធៀបរយៈពេលរក្សាទុកជាមួយនឹងគំរូស្តង់ដារ។លក្ខណៈវិនិច្ឆ័យមិនគ្រប់គ្រាន់ការបញ្ជាក់បន្ថែម (គុណភាព)

1. វិធីសាស្រ្តបន្ថែមស្តង់ដារ

2. ប្រើវិធីសាស្រ្តផ្សេងទៀតក្នុងពេលដំណាលគ្នា៖ វិធីសាស្រ្ត chromatographic ផ្សេងទៀត (ផ្លាស់ប្តូរយន្តការដូចជា៖ ការប្រើជួរឈរ chromatographic ផ្សេងគ្នា) ឧបករណ៍រាវរកផ្សេងទៀត (PDA: ការប្រៀបធៀបវិសាលគម ការស្វែងរកបណ្ណាល័យវិសាលគម MS: ការវិភាគវិសាលគមដ៏ធំ ការស្វែងរកបណ្ណាល័យវិសាលគម)

3. ឧបករណ៍និងវិធីសាស្រ្តផ្សេងទៀត។

ផ្នែក
០៦ ការបញ្ជាក់អំពីភាពស៊ីសង្វាក់គ្នានៃកំពូលបរិមាណ

បញ្ជាក់​ភាព​ស៊ីសង្វាក់​គ្នា​នៃ​កម្រិត​កំពូល (ភាព​បរិសុទ្ធ)

សូម​ប្រាកដ​ថា​មាន​សមាសធាតុ​ដែល​បាន​វាស់វែង​តែ​មួយ​ប៉ុណ្ណោះ​នៅ​ក្រោម​កំពូល​ក្រូម៉ាត​ក្រាហ្វិក​នីមួយៗ

ពិនិត្យរកមើលការជ្រៀតជ្រែកពីសារធាតុរួមផ្សំ (មិនបរិសុទ្ធ)

វិធីសាស្រ្តសម្រាប់បញ្ជាក់ពីភាពស៊ីសង្វាក់គ្នានៃកំពូល Chromatographic (ភាពបរិសុទ្ធ)

ការប្រៀបធៀប Spectrograms ជាមួយ Photodiode Matrix (PDA) Detectors

ការកំណត់អត្តសញ្ញាណភាពបរិសុទ្ធកំពូល

2996 ទ្រឹស្ដីមុំនៃភាពបរិសុទ្ធ

វិធីសាស្រ្តបរិមាណដែលប្រើជាទូទៅក្នុង PART 07

វិធីសាស្ត្រខ្សែកោងស្តង់ដារ បែងចែកជាវិធីសាស្ត្រស្តង់ដារខាងក្រៅ និងវិធីសាស្ត្រស្តង់ដារខាងក្នុង៖

1. វិធីសាស្រ្តស្តង់ដារខាងក្រៅ៖ ភាគច្រើនប្រើក្នុងរាវក្រូម៉ាតូក្រាម

ស៊េរីនៃសំណាកស្តង់ដារនៃកំហាប់ដែលគេស្គាល់ត្រូវបានរៀបចំដោយប្រើសំណាកសុទ្ធនៃសមាសធាតុដែលត្រូវធ្វើតេស្តជាគំរូស្តង់ដារ។ចាក់ចូលទៅក្នុងជួរឈររហូតដល់តម្លៃឆ្លើយតបរបស់វា (តំបន់កំពូល) ។
នៅក្នុងជួរជាក់លាក់មួយ មានទំនាក់ទំនងលីនេអ៊ែរល្អរវាងការផ្តោតអារម្មណ៍នៃគំរូស្តង់ដារ និងតម្លៃឆ្លើយតប ពោលគឺ W=f×A ហើយខ្សែកោងស្តង់ដារត្រូវបានបង្កើតឡើង។

នៅក្រោមលក្ខខណ្ឌពិសោធន៍ដូចគ្នា ចាក់សំណាកដែលមិនស្គាល់ ដើម្បីទទួលបានតម្លៃឆ្លើយតបនៃសមាសធាតុដែលត្រូវវាស់។យោងតាមមេគុណដែលគេស្គាល់ f កំហាប់នៃសមាសធាតុដែលត្រូវវាស់អាចទទួលបាន។

គុណសម្បត្តិនៃវិធីសាស្ត្រស្តង់ដារខាងក្រៅ៖ប្រតិបត្តិការសាមញ្ញ និងការគណនា វាគឺជាវិធីសាស្រ្តបរិមាណដែលប្រើជាទូទៅ។មិនចាំបាច់សម្រាប់សមាសធាតុនីមួយៗត្រូវបានរកឃើញ និងដកចេញ។គំរូស្តង់ដារត្រូវបានទាមទារ;លក្ខខណ្ឌរង្វាស់នៃគំរូស្តង់ដារ និងគំរូដែលមិនស្គាល់គួរតែស្របគ្នា។បរិមាណចាក់គួរតែច្បាស់លាស់។

គុណវិបត្តិនៃវិធីសាស្ត្រស្តង់ដារខាងក្រៅ៖លក្ខខណ្ឌពិសោធន៍ត្រូវបានទាមទារឱ្យខ្ពស់ដូចជា ភាពប្រែប្រួលនៃឧបករណ៍ចាប់ អត្រាលំហូរ និងសមាសភាពនៃដំណាក់កាលចល័តមិនអាចផ្លាស់ប្តូរបានទេ។បរិមាណនៃការចាក់នីមួយៗគួរតែមានភាពល្អឡើងវិញ។

2. វិធីសាស្រ្តស្តង់ដារផ្ទៃក្នុង៖ ត្រឹមត្រូវ ប៉ុន្តែមានបញ្ហា ភាគច្រើនប្រើក្នុងវិធីសាស្ត្រស្តង់ដារ

ចំនួនដែលបានស្គាល់នៃស្តង់ដារផ្ទៃក្នុងត្រូវបានបន្ថែមទៅស្តង់ដារដើម្បីបង្កើតស្តង់ដារចម្រុះ ហើយស្តង់ដារការងារមួយចំនួននៃការប្រមូលផ្តុំដែលគេស្គាល់ត្រូវបានរៀបចំ។សមាមាត្រថ្គាមនៃស្តង់ដារទៅនឹងស្តង់ដារផ្ទៃក្នុងនៅក្នុងស្តង់ដារចម្រុះនៅតែមិនផ្លាស់ប្តូរ។ចាក់ចូលទៅក្នុងជួរឈរ chromatographic ហើយយក (តំបន់កំពូលគំរូស្តង់ដារ / តំបន់កំពូលគំរូស្តង់ដារខាងក្នុង) ជាតម្លៃឆ្លើយតប។យោងតាមទំនាក់ទំនងលីនេអ៊ែររវាងតម្លៃឆ្លើយតបនិងការផ្តោតអារម្មណ៍នៃស្តង់ដារការងារគឺ W = f × A ខ្សែកោងស្តង់ដារត្រូវបានបង្កើតឡើង។

បរិមាណស្តង់ដារខាងក្នុងដែលគេស្គាល់ត្រូវបានបន្ថែមទៅគំរូដែលមិនស្គាល់ ហើយចាក់ចូលទៅក្នុងជួរឈរដើម្បីទទួលបានតម្លៃឆ្លើយតបនៃសមាសធាតុដែលត្រូវវាស់។យោងតាមមេគុណដែលគេស្គាល់ f កំហាប់នៃសមាសធាតុដែលត្រូវវាស់អាចទទួលបាន។

លក្ខណៈនៃវិធីសាស្ត្រស្តង់ដារផ្ទៃក្នុង៖កំឡុងពេលប្រតិបត្តិការ គំរូ និងស្តង់ដារខាងក្នុងត្រូវបានលាយបញ្ចូលគ្នា ហើយចាក់ចូលទៅក្នុងជួរឈរក្រូម៉ាត ដូច្នេះដរាបណាសមាមាត្រនៃបរិមាណនៃសមាសធាតុវាស់ទៅនឹងស្តង់ដារផ្ទៃក្នុងនៅក្នុងដំណោះស្រាយចម្រុះគឺថេរ ការផ្លាស់ប្តូរបរិមាណគំរូ នឹងមិនប៉ះពាល់ដល់លទ្ធផលបរិមាណទេ។.វិធីសាស្ត្រស្តង់ដារខាងក្នុងទូទាត់ឥទ្ធិពលនៃបរិមាណគំរូ និងសូម្បីតែដំណាក់កាលចល័ត និងឧបករណ៍ចាប់ ដូច្នេះវាមានភាពត្រឹមត្រូវជាងវិធីសាស្ត្រស្តង់ដារខាងក្រៅ។

ផ្នែក
08 កត្តាដែលប៉ះពាល់ដល់លទ្ធផលវិភាគបរិមាណ

ភាពត្រឹមត្រូវខ្សោយអាចបណ្តាលមកពី៖

ការរួមបញ្ចូលតំបន់កំពូលមិនត្រឹមត្រូវ ការបំបែកគំរូ ឬភាពមិនបរិសុទ្ធដែលបានណែនាំកំឡុងពេលរៀបចំគំរូ ដបគំរូមិនត្រូវបានផ្សាភ្ជាប់ គំរូ ឬសារធាតុរំលាយសារធាតុរំលាយ ការរៀបចំគំរូមិនត្រឹមត្រូវ បញ្ហាចាក់គំរូ ការរៀបចំស្តង់ដារខាងក្នុងមិនត្រឹមត្រូវ

ហេតុផលដែលអាចកើតមានសម្រាប់ភាពជាក់លាក់ខ្សោយ៖

ការរួមបញ្ចូលកំពូលមិនត្រឹមត្រូវ បញ្ហានៃការចាក់ ឬចាក់ថ្នាំ ការបំបែកគំរូ ឬភាពមិនបរិសុទ្ធដែលបានណែនាំក្នុងអំឡុងពេលនៃការរៀបចំគំរូ បញ្ហាក្រូម៉ាត ការឆ្លើយតបរបស់ឧបករណ៍ចាប់ដែលខូចគុណភាព